什么是永生化？
永生化是一種細胞生物學術(shù)語。是指動物細胞脫分化失敗，受到病毒感染，外源惡意代碼轉(zhuǎn)染，輻射或藥劑作用后，細胞分裂次數(shù)限制機制和DNA檢查-自毀機制失靈，導致細胞具有無限分裂生長的能力的過程成為細胞永生化。
（永生化原理圖）
永生化細胞的價值
1.永生化細胞穩(wěn)定均一、性狀一致，是體外研究細胞增殖、分化、凋亡、衰老等的理想模型
2.可使傳代困難、增殖慢、易衰老的細胞獲得永生，并且永生化細胞比原代細胞更易于培養(yǎng)，因為它們生長更強勁，可以獲得更多的細胞資源，也節(jié)省了分離細胞的周期，降低反復分離原代細胞的成本
3.永生化細胞和腫瘤細胞關(guān)系密切，是研究腫瘤發(fā)生機制的重要模型
4.永生化細胞可建立穩(wěn)定細胞庫，遺傳上相同的種群，有助于提供一致且可重復的實驗結(jié)果
不同細胞永生化的方法也不同
HPV 可介導人的包皮細胞、角化上皮以及乳腺、胰導管和口腔等的上皮細胞永生化
猿猴病毒的SV40大T抗原 (TAg)用于黏附細胞、成纖維細胞、內(nèi)皮細胞等
EBV 用于淋巴母細胞樣細胞
端粒酶TERT 用于間充質(zhì)干細胞和其他一些細胞
永生化成功的標志
1.細胞類型未發(fā)生轉(zhuǎn)化(通過觀察分析)
2.細胞可以持續(xù)穩(wěn)定地分裂(與原代細胞進行同步傳代驗證分析)
目前，較為常用是SV40大T抗原(TAg)和人端粒酶催化亞基(TERT)。此外，還有抑癌基因如p53, pRb等表達受到抑制，使得細胞老化途徑受阻。
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產(chǎn)品清單
引文展示
案例一：建立Hertwig上皮根鞘原代細胞(HERS)永生化細胞系
吉滿助力
使用pGMLV-SV40T-PURO(Genomeditech Co., Ltd.)轉(zhuǎn)染原代分離的1代HERS細胞，采用有限稀釋方法篩選并鑒定得到可培養(yǎng)超過50代以上的單克隆細胞HERS-H1和HERS-C2。通過CCK-8法、免疫熒光染色和real-time PCR檢測了HERS-H1和HERS-C2細胞的增殖、上皮-間充質(zhì)轉(zhuǎn)化能力和上皮-間充質(zhì)相互作用等特征。HERS-C2細胞具有EMT特征，在體外可分化為牙骨質(zhì)形成細胞，在體內(nèi)可生成牙骨質(zhì)樣組織。HERS-H1能誘導DPCs在體外向成牙本質(zhì)細胞分化，在體內(nèi)生成牙本質(zhì)樣組織。
來源于Stem Cell Res.Ther.(IF:7.5;Q1).2019 Jan 3;10(1):3.DOI:10.1186/s13287-018-1106-8
案例二：建立肺泡巨噬細胞（AMs）永生化細胞系
吉滿助力
作者從RGS1fl/fl；Flt3-creERt2 YFP 和 RGS1 fl/fl ；Tie2-creERt2 YFP小鼠分離獲得的Flt3+ AMs和Tie2+ AMs細胞(圖B) 經(jīng)pGMLV-SV40T lentivirus(Genomeditech Co., Ltd.) 慢病毒感染獲得穩(wěn)定傳代的AMs永生化細胞系，加tamoxifen誘導后，流式檢測RGS1和YFP的表達變化(圖C)。
來源于Cell Death Differ(IF:12.4;Q1).2021 Jul;28(7):2238-2256.DOI:10.1038/s41418-021-00750-x.
