背景介紹
報(bào)告基因是一類使表達(dá)產(chǎn)物易于被檢測(cè)的基因，其作用原理是將報(bào)告基因的編碼序列及其表達(dá)調(diào)控序列與目的基因融合形成嵌合基因，在調(diào)控序列的作用下進(jìn)行表達(dá)，通過(guò)對(duì)報(bào)告基因表達(dá)產(chǎn)物的檢測(cè)來(lái)評(píng)價(jià)目的基因的表達(dá)狀況。常見(jiàn)的報(bào)告基因包括螢光素酶(Luciferase)、氯霉素乙酰轉(zhuǎn)移酶(CAT)、β-半乳糖苷酶(β-gal)、分泌性人胎盤堿性磷酸酶(SEAP)和綠色熒光蛋白(GFP)等。
螢火蟲(chóng)螢光素酶
螢火蟲(chóng)螢光素酶(Firefly luciferase)是一種分子量約為61kDa的蛋白，在ATP、鎂離子和氧氣存在的條件下，能夠催化螢光素(luciferin)氧化成oxyluciferin，在氧化的過(guò)程中會(huì)發(fā)出波長(zhǎng)為560nm左右的生物熒光。由于特異性強(qiáng)、靈敏度高、內(nèi)源性低、檢測(cè)不受細(xì)胞內(nèi)其他物質(zhì)的影響等優(yōu)點(diǎn)，螢光素酶被作為報(bào)告基因(標(biāo)記蛋白)而被廣泛應(yīng)用。
（熒光蟲(chóng)熒光素酶檢測(cè)原理圖）
產(chǎn)品一覽
一、GMOne-Step熒光素酶報(bào)告基因檢測(cè)試劑盒
吉滿生物自主研發(fā)的GMOne-Step?熒光素酶報(bào)告基因檢測(cè)試劑盒(GMOne-Step Luciferase Reporter Gene Assay Kit，簡(jiǎn)稱GMOne-Step) 操作簡(jiǎn)便，實(shí)驗(yàn)前無(wú)需對(duì)細(xì)胞進(jìn)行清洗或收集，可直接使用，省去了混合試劑的步驟，節(jié)省了實(shí)驗(yàn)時(shí)間。本試劑盒在發(fā)光值與穩(wěn)定性之間做到了相對(duì)平衡。使得實(shí)驗(yàn)結(jié)果準(zhǔn)確可靠。具有操作簡(jiǎn)單、靈敏度高、穩(wěn)定性好的優(yōu)勢(shì)！點(diǎn)擊了解產(chǎn)品
貨號(hào) | 規(guī)格 |
GM-040503A | 100T |
GM-040503B | 100T*10 |
GM-040503C | 1000T |
GMOne-Step熒光素酶報(bào)告基因檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品清單
產(chǎn)品應(yīng)用
適用于基于報(bào)告基因的生物活性檢測(cè)，例如：Fc效應(yīng)檢測(cè)、T細(xì)胞激活檢測(cè)、免疫檢查點(diǎn)檢測(cè)、細(xì)胞因子、生長(zhǎng)因子檢測(cè)等。
*吉滿生物依托特有的熒光素酶報(bào)告基因系統(tǒng)，并基于藥物的作用機(jī)制(MOA)，構(gòu)建了一系列螢火蟲(chóng)熒光素酶報(bào)告基因細(xì)胞系產(chǎn)品，覆蓋大部分具有功能活性的靶點(diǎn)，聯(lián)合使用該試劑，能更加有效地幫助研究人員對(duì)小分子藥物、單抗、雙特異性抗體等藥物體外生物學(xué)活性評(píng)價(jià)。
數(shù)據(jù)展示
圖注：吉滿生物GMOne-Step和競(jìng)品公司P、競(jìng)品公司1、競(jìng)品公司2的化學(xué)發(fā)光穩(wěn)定性的對(duì)比圖。如圖所示GMOne-Step擁有更好的穩(wěn)定性，在前20min內(nèi)熒光衰減不超過(guò)5%
圖注：吉滿生物GMOne-Step擁有良好的孔間穩(wěn)定性（±3%左右）
圖注：吉滿生物GMOne-Step具有良好的線性關(guān)系
二、雙熒光素酶（Dual Luciferase）報(bào)告基因檢測(cè)試劑盒
雙螢光素酶報(bào)告基因檢測(cè)系統(tǒng)在單螢光素酶報(bào)告基因的基礎(chǔ)上引入了“內(nèi)參對(duì)照”報(bào)告基因，這樣可以在最大程度上減小細(xì)胞數(shù)目、細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)和轉(zhuǎn)染效率等外在因素對(duì)于實(shí)驗(yàn)的影響，使得實(shí)驗(yàn)結(jié)果更為可信。
為什么采用雙熒光素酶報(bào)告系統(tǒng)？
單報(bào)告基因?qū)嶒?yàn)往往會(huì)受到各種實(shí)驗(yàn)條件的影響，而雙報(bào)告基因則通過(guò)共轉(zhuǎn)染的“對(duì)照”為實(shí)驗(yàn)提供一基準(zhǔn)線，從而可以在最大程度上減小細(xì)胞活性和轉(zhuǎn)染效率等外在因素對(duì)實(shí)驗(yàn)的影響，使得數(shù)據(jù)結(jié)果更為可信。一般情況下，海腎熒光素酶基因作為內(nèi)參使用，將兩個(gè)報(bào)告基因構(gòu)建到同一個(gè)質(zhì)粒上，分別用不同的啟動(dòng)子啟動(dòng)其表達(dá)。這樣就可以減少內(nèi)在變化因素對(duì)實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)確性的影響，相當(dāng)于做了標(biāo)準(zhǔn)化，使測(cè)試結(jié)果不受實(shí)驗(yàn)條件變化的干擾。計(jì)算結(jié)果時(shí)，將螢火蟲(chóng)熒光素酶的檢測(cè)值除以海腎熒光素酶檢測(cè)值(Firefly luciferase/Renilla luciferase)即可。
（海腎熒光素酶檢測(cè)原理圖）
| 貨號(hào) | 規(guī)格 |
| GM-040502A | 100次 |
雙熒光素酶（Dual Luciferase）報(bào)告基因檢測(cè)試劑盒
產(chǎn)品特點(diǎn)
快捷簡(jiǎn)便、靈敏度高、安全可靠、穩(wěn)定準(zhǔn)確
產(chǎn)品應(yīng)用
啟動(dòng)子研究：啟動(dòng)子結(jié)構(gòu)分析、啟動(dòng)子SNP分析
轉(zhuǎn)錄調(diào)控研究
信號(hào)通路研究
microRNA研究：驗(yàn)證microRNA同mRNA/lncRNA/circRNA靶向互作
三、D-熒光素鈉鹽，D-熒光素鉀鹽，D-熒光素(游離酸)
D-熒光素(D-Luciferin)是熒光素酶(Luciferase)的常用底物，普遍用于整個(gè)生物技術(shù)領(lǐng)域，特別是體內(nèi)活體成像技術(shù)。作用原理是熒光素酶在Mg2+和O2參與下催化熒光素氧化成oxyluciferin，在熒光素的氧化過(guò)程中，發(fā)出生物熒光(bioluminomescence)。當(dāng)熒光素過(guò)量時(shí)，產(chǎn)生的光量子數(shù)與熒光素酶的濃度呈正相關(guān)性，可以通過(guò)化學(xué)發(fā)光儀或液閃測(cè)定儀測(cè)定生物熒光。
產(chǎn)品名稱 | 貨號(hào) | 規(guī)格 |
D-Luciferin, Sodium Salt D 熒光素鈉鹽 | GM-040611 | 1g/5g/100mg/500mg |
D-Luciferin, Potassium Salt D 熒光素鉀鹽 | GM-040621 | 1g/5g/100mg/500mg |
D-Luciferin Firefly,free acid | GM-040601 | 1g/100mg/500mg |
D-熒光素產(chǎn)品列表
產(chǎn)品區(qū)別
D-熒光素鈉鹽的溶解度略高于鉀鹽，但是鉀鹽的穩(wěn)定性略高于鈉鹽。這是因?yàn)殁c離子對(duì)熒光素酶的活性有一定的抑制作用，而鉀離子則沒(méi)有。因此，如果實(shí)驗(yàn)條件允許，建議使用鉀鹽而不是鈉鹽；D-熒光素游離酸在水和緩沖液中的溶解性很差，而鈉鹽、鉀鹽則可以很容易地溶解在水或緩沖液中，因此鈉鹽、鉀鹽更適合體內(nèi)實(shí)驗(yàn)，而游離酸則需要更多的注意事項(xiàng)。
產(chǎn)品應(yīng)用
報(bào)告基因分析
In vivo imaging (動(dòng)物活體成像)
In vitro imaging (細(xì)胞體外分析)
ATP測(cè)定
其它luciferase及其基因相關(guān)的分析和研究工作
報(bào)告基因檢測(cè)服務(wù)
雙螢光素酶檢測(cè)作為機(jī)制研究的利器，在研究中應(yīng)用的越來(lái)越廣泛，吉滿提供一站式服務(wù)，助力科學(xué)研究。
| 1 | 根據(jù)實(shí)驗(yàn)?zāi)康脑O(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)方案 |
| 2 | 預(yù)測(cè)結(jié)合位點(diǎn) |
| 3 | 構(gòu)建野生/突變報(bào)告基因載體系統(tǒng) |
| 4 | 共轉(zhuǎn)染細(xì)胞 |
| 5 | 上機(jī)檢測(cè) |
