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pGMLV-CMV-RFP-GFP-hLC3-Puro Lentivirus
產(chǎn)品簡介

       細(xì)胞自噬(autophagy)是真核生物中進(jìn)化保守的對(duì)細(xì)胞內(nèi)物質(zhì)進(jìn)行周轉(zhuǎn)的重要過程。該過程中一些損壞的蛋白或細(xì)胞器被雙層膜結(jié)構(gòu)的自噬小泡包裹后,送入溶酶體(動(dòng)物)或液泡(酵母和植物)中進(jìn)行降解并得以循環(huán)利用。

        檢測自噬形成時(shí),使用電鏡耗時(shí)長,不利于監(jiān)測(Monitoring)自噬形成,而hLC3在自噬形成過程中會(huì)發(fā)生聚集的現(xiàn)象,因此吉滿生物利用hLC3這種現(xiàn)象,構(gòu)建了帶GFP和RFP標(biāo)記的用于細(xì)胞自噬檢測的慢病毒和腺病毒產(chǎn)品。無自噬時(shí),RFP-GFP-hLC3融合蛋白彌散在胞漿中,在熒光顯微鏡下顯示為黃色斑點(diǎn);自噬形成時(shí),由于自噬小體進(jìn)入第二階段后,與溶酶體進(jìn)行融合,形成自噬溶酶體。自噬溶酶體由于溶酶體內(nèi)部的酸性環(huán)境,可以導(dǎo)致PH下降,GFP淬滅,因此,GFP的減弱可指示自噬溶酶體形成的順利程度,GFP越少,則從自噬小體到自噬溶酶體階段流通得越順暢。反之,自噬小體和溶酶體融合被抑制,自噬溶酶體進(jìn)程受阻。RFP是一直穩(wěn)定表達(dá)的,因此通過不同顏色斑點(diǎn)的計(jì)數(shù)可以清晰看出自噬流的強(qiáng)弱。


圖譜信息

image.png

產(chǎn)品規(guī)格
產(chǎn)品貨號(hào)產(chǎn)品名稱包裝規(guī)格
GM-0220LV05-1pGMLV-CMV-RFP-GFP-hLC3-Puro Lentivirus100ul*5管(1E8TU/mL)
GM-0220LV05-2100ul*10管(1E8TU/mL)


注意事項(xiàng)

1. 病毒操作時(shí)最好使用生物安全柜,如使用普通超凈工作臺(tái)操作病毒,請不要打開風(fēng)機(jī)。

2. 病毒操作時(shí)請穿實(shí)驗(yàn)服,帶口罩和乳膠手套。

3. 操作病毒時(shí)必須特別小心,不要產(chǎn)生氣霧或飛濺。如操作時(shí)超凈臺(tái)有病毒污染,立即用10%次氯酸鈉溶液搽拭干凈。接觸過病毒的槍頭、離心管和培養(yǎng)板等需用10%次氯酸鈉溶液浸泡1h以上后棄去。

4. 用顯微鏡觀察細(xì)胞感染情況時(shí)應(yīng)遵從以下步驟:擰緊培養(yǎng)瓶或蓋緊培養(yǎng)板。用70%乙醇清理培養(yǎng)瓶外壁后到顯微鏡出觀察拍照。離開顯微鏡試驗(yàn)臺(tái)前,用70%乙醇清理實(shí)驗(yàn)臺(tái)。

5. 病毒操作完成后,用肥皂清洗雙手。


保存條件

-80℃保存。(保存時(shí)間以12個(gè)月以內(nèi)為宜,如保存時(shí)間過長,使用前請重新檢測病毒滴度)


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pGMLV-CMV-RFP-GFP-hLC3-Puro Lentivirus
產(chǎn)品簡介

       細(xì)胞自噬(autophagy)是真核生物中進(jìn)化保守的對(duì)細(xì)胞內(nèi)物質(zhì)進(jìn)行周轉(zhuǎn)的重要過程。該過程中一些損壞的蛋白或細(xì)胞器被雙層膜結(jié)構(gòu)的自噬小泡包裹后,送入溶酶體(動(dòng)物)或液泡(酵母和植物)中進(jìn)行降解并得以循環(huán)利用。

        檢測自噬形成時(shí),使用電鏡耗時(shí)長,不利于監(jiān)測(Monitoring)自噬形成,而hLC3在自噬形成過程中會(huì)發(fā)生聚集的現(xiàn)象,因此吉滿生物利用hLC3這種現(xiàn)象,構(gòu)建了帶GFP和RFP標(biāo)記的用于細(xì)胞自噬檢測的慢病毒和腺病毒產(chǎn)品。無自噬時(shí),RFP-GFP-hLC3融合蛋白彌散在胞漿中,在熒光顯微鏡下顯示為黃色斑點(diǎn);自噬形成時(shí),由于自噬小體進(jìn)入第二階段后,與溶酶體進(jìn)行融合,形成自噬溶酶體。自噬溶酶體由于溶酶體內(nèi)部的酸性環(huán)境,可以導(dǎo)致PH下降,GFP淬滅,因此,GFP的減弱可指示自噬溶酶體形成的順利程度,GFP越少,則從自噬小體到自噬溶酶體階段流通得越順暢。反之,自噬小體和溶酶體融合被抑制,自噬溶酶體進(jìn)程受阻。RFP是一直穩(wěn)定表達(dá)的,因此通過不同顏色斑點(diǎn)的計(jì)數(shù)可以清晰看出自噬流的強(qiáng)弱。


圖譜信息

image.png

產(chǎn)品規(guī)格
產(chǎn)品貨號(hào)產(chǎn)品名稱包裝規(guī)格
GM-0220LV05-1pGMLV-CMV-RFP-GFP-hLC3-Puro Lentivirus100ul*5管(1E8TU/mL)
GM-0220LV05-2100ul*10管(1E8TU/mL)


注意事項(xiàng)

1. 病毒操作時(shí)最好使用生物安全柜,如使用普通超凈工作臺(tái)操作病毒,請不要打開風(fēng)機(jī)。

2. 病毒操作時(shí)請穿實(shí)驗(yàn)服,帶口罩和乳膠手套。

3. 操作病毒時(shí)必須特別小心,不要產(chǎn)生氣霧或飛濺。如操作時(shí)超凈臺(tái)有病毒污染,立即用10%次氯酸鈉溶液搽拭干凈。接觸過病毒的槍頭、離心管和培養(yǎng)板等需用10%次氯酸鈉溶液浸泡1h以上后棄去。

4. 用顯微鏡觀察細(xì)胞感染情況時(shí)應(yīng)遵從以下步驟:擰緊培養(yǎng)瓶或蓋緊培養(yǎng)板。用70%乙醇清理培養(yǎng)瓶外壁后到顯微鏡出觀察拍照。離開顯微鏡試驗(yàn)臺(tái)前,用70%乙醇清理實(shí)驗(yàn)臺(tái)。

5. 病毒操作完成后,用肥皂清洗雙手。


保存條件

-80℃保存。(保存時(shí)間以12個(gè)月以內(nèi)為宜,如保存時(shí)間過長,使用前請重新檢測病毒滴度)


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