細(xì)胞自噬(autophagy)是真核生物中進(jìn)化保守的對(duì)細(xì)胞內(nèi)物質(zhì)進(jìn)行周轉(zhuǎn)的重要過程。該過程中一些損壞的蛋白或細(xì)胞器被雙層膜結(jié)構(gòu)的自噬小泡包裹后，送入溶酶體(動(dòng)物）或液泡（酵母和植物）中進(jìn)行降解并得以循環(huán)利用。
檢測自噬形成時(shí)，使用電鏡耗時(shí)長，不利于監(jiān)測（Monitoring）自噬形成，而hLC3在自噬形成過程中會(huì)發(fā)生聚集的現(xiàn)象，因此吉滿生物利用hLC3這種現(xiàn)象，構(gòu)建了帶GFP和RFP標(biāo)記的用于細(xì)胞自噬檢測的慢病毒和腺病毒產(chǎn)品。無自噬時(shí)，RFP-GFP-hLC3融合蛋白彌散在胞漿中，在熒光顯微鏡下顯示為黃色斑點(diǎn)；自噬形成時(shí)，由于自噬小體進(jìn)入第二階段后，與溶酶體進(jìn)行融合，形成自噬溶酶體。自噬溶酶體由于溶酶體內(nèi)部的酸性環(huán)境，可以導(dǎo)致PH下降，GFP淬滅，因此，GFP的減弱可指示自噬溶酶體形成的順利程度，GFP越少，則從自噬小體到自噬溶酶體階段流通得越順暢。反之，自噬小體和溶酶體融合被抑制，自噬溶酶體進(jìn)程受阻。RFP是一直穩(wěn)定表達(dá)的，因此通過不同顏色斑點(diǎn)的計(jì)數(shù)可以清晰看出自噬流的強(qiáng)弱。
